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HIV抗體檢測

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2014-08-14 3022

HIV抗體檢測目的

在孕期,HIV能通過胎盤傳染給胎兒,或分娩時經產道及出生后經母乳喂養感染新生兒,所以HIV檢查是很有必要的。

HIV主要通過性傳播,包括同性接觸及異性接觸。所以與HIV/AIDS患者密切接觸、有靜脈注射毒品、使用進口血液制品、性紊亂及多個性伴侶、患多種性傳播性疾病的高危人群,應進行HIV抗體檢測。HIV病毒攜帶者或感染者,應選擇終止妊娠。

HIV抗體檢測參考指標

HIV抗體檢測定量的正常值范圍是0—1。超過1就是陽性。如果檢測結果呈陽性,則需進一步檢查。如果是呈陰性,一是受檢者沒有感染艾滋病病毒;二是雖受到艾滋病病毒感染,但還沒有產生足夠的能檢測出的抗體,仍處窗口期內。如果確實有過高危行為,要隨訪3-6個月。

免疫印跡試驗(WB)、條帶免疫試驗(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉淀試驗(RIPA)及免疫熒光試驗(IFA)。國內常用的確認試驗方法是WB。

(一)免疫印跡實驗(westernblot,WB)是廣泛用于許多傳染病診斷的實驗方法,就HIV的病原學診斷而言,它是首選的用以確認HIV抗體的確認實驗方法,WB的檢測結果常常被作為鑒別其他檢驗方法優劣的金標準”。

確認試驗流程:

有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測,如果呈陰性反應,則報告HIV抗體陰性;如果呈陽性反應,則報告HIV-1抗體陽性;如果不滿足陽性標準,則判為HIV抗體檢測結果不確定。如果出現HIV-2型的特異性指示條帶,需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確認試驗,呈陰性反應,報告HIV-2抗體陰性;呈陽性反應則報告HIV-2抗體血清學陽性,并將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析,

WB的敏感性一般不低于初篩實驗,但它的特異性很高,這主要是基于HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化,能夠檢測針對不同抗原成分的抗體,因而能夠用WB方法鑒別初篩實驗的準確性。從WB確認試驗結果看出,初篩試驗盡管選擇質量較好的試劑,如第三代ELISA,仍會有假陽性出現,必須通過確認試驗才能得出準確結果。

(二)免疫熒光實驗(IFA)

IFA法經濟、簡便、快速,曾被FDA推薦用于WB不確定樣品的診斷。但需要昂貴的熒光顯微鏡,需要受過良好訓練的技術人員、觀察和解釋結果易受主觀因素的影響,結果不宜長期保存,IFA不宜在一般的實驗室開展和應用。

HIV抗體確證試驗結果報告

HIV抗體確證試驗結果用附表3報告。

(1)符合HIV-1抗體陽性判斷標準,報告HIV-1抗體陽性(+)”,并按規定做好檢測后咨詢、保密和疫情報告工作。符合HIV-2抗體陽性判斷標準,報告HIV-2抗體陽性(+)”,并按規定做好檢測后咨詢、保密和疫情報告工作。

(2)符合HIV抗體陰性判斷標準,報告HIV抗體陰性(-)”。如疑似窗口期”感染,建議進一步做HIV核酸檢測,盡早明確診斷。

(3)符合HIV抗體不確定判斷標準,報告HIV抗體不確定(±)”,在備注中應注明等待4周后復檢”。

做HIV抗體檢測前注意事項

1、檢測前半小時應適量飲水避免血液過于粘稠。

2、準備好:酒精,藥棉,計時器 并用用清水和肥皂洗干凈雙手。

3、檢測應在室溫4度以上進行操作;扎針取血前應該先用酒精消毒采血部位(一般是手指),然后按摩,促使血液流通。

4、出血后,可輕輕擠手指,將受檢血液滴入加樣孔,一般用3滴血。

5、滴入血液后10秒,滴入1滴緩沖液就足夠了,此時開始計時。(如果血液足夠順利到達檢測C區可不加緩沖液)

6、加樣后15分鐘可以觀察結果,一條線為陰性,二條線為陽性,超過30分鐘結果不準確。(15-30分鐘結果最準確。)

HIV抗體檢測方法

酶聯免疫吸附試驗 目前應用的ELISA法有8種之多。它們的特異性和敏感性超過99%。 顆粒凝集法 PA為快速、簡便的一種篩選方法。如屬陽性,應經WB證實。PA不需任何特殊儀器,其結果用肉眼可判別。全過程僅需5分鐘。缺點有假陽性,且價格昂貴。

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